Metody detekce lidských papilomavirů

V průběhu let byla vyvinuta řada metod pro detekci papilomavirové infekce. Liší se sensitivitou I schopností rozpoznat jednotlivé typy HPV. Některé jsou proto vhodné pro rutinní klinickou praxi (např. kolposkopie, cytologie) zatímco jiné (např. Imunocytochemické a histochemické metody, DNA hybridizace) se uplatňují ve screeningu a výzkumu.

Jednotlivé metody a jejich limity jsou popsány dále:

Metody detekce lidské papilomavirové infekce Vyšetření kůže nebo jiné tkáně prostým okem Lupové zvětšení sliznice genitálního traktu pomocí kolposkopie Morfologické vyšetření histologických řezů nebo cervikálních nátěrů Imunocytochemické průkazy v histologických a cytologických vzorcích Elektronová mikroskopie verukózních lézí DNA hybridizace s užitím PCR nebo Hybrid Capture 2

Lidské papilomaviry vyvolávají typicky benigní verukózní léze dlaždicového epitelu rozpoznatelné pouhým okem. Obvykle se vyskytují na kůži (nejvíce na rukou) a zevním genitálu. Jsou vysoce infekční, zpravidla však spontánně regredují.

Kolposkopie dovoluje detekci subklinických infekcí obvykle prostým okem neviditelných. Po aplikaci kyseliny octové se čípek zabarví bělavě a léze jsou viditelné. Pokud nejsou yvvinuty kondylomy, nelze je spolehlivě rozlišit od CIN.

Histologické vzorky vykazují přítomnost koilocytů, monocelulární keratinizaci, parakeratózu, akantózu a vícejaderných buněk.

Tyto změny se odrážejí i v cytologických stěrech. Nicméně kolposkopie, histologie, cytologie, ani imunologické průkazy nedovolují typizaci HPV nebo detekci virové integrace a neodhalí latentní infekci.

Elektronová mikroskopie může být použita k průkazu papilomavirových partikulí v seškrabech z povrchových bradavic, metoda je však užívána zřídka, protože kompletní virové částice jsou zřídkavé. Uspokojivá kultivační metoda nebyla vyvinuta.

DNA analýza se stala metodou volby vzhledem k limitům ostatních diagnostických metod. Nejspolehlivější testy HPV se opírají o detekci virové DNA. Protože všechny HPV typy jsou blízce příbuzné, testy jsou vyvinuty kdetekci cílových struktur rozlišujících jednotlivé typy HPV. Hybrid capture poskytuje virový profil různých HPV typů, které mohou být dále identifikovány pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR). Metody založené na PCR používají výběr shodných primerů k identifikaci specifickýh typů HPV. Hybrid Capture 2 (Digene Diagnostics, Gaithersburg, MD, USA) byl schválen American Food and Drug Agency (FDA) jako doplněk k cytologickému screeningu žen nad 30 let. Je obecně přijímáno, že jak PCR a HC2 spolehlivě detegují papilomaviry vysokého rizika i další v klinických vzorcích.

 (For further  reading see  Denny LA and Wright TC in  Best Practice and Research in Clinical Obstetrics and  Gynaecology2005  vol 19,no4,pp501-505 Also available on line at http://www.sciencedirect.com ).