Recolección de muestras

Las muestras pueden ser obtenidas en tres formas diferentes

1. Scraping the ectocervix with with a modified spatula (the Ayre spatula or a variation of it). This is the most widely used method in Europe for obtaining material for preparing conventional cervical smears
2. Using an endocervical brush to sample the endocervix..
3. Using a broom like device which samples both endo and ectocervix. These can be used for preparing conventional smear. Some devices have been modified for the preparation of liquid based cytology (LBC) specimens

Los siguientes pasos son esenciales para garantizar que la prueba de Pap es realizada correctamente

1. Se debe colocar un espéculo en la vagina y el cuello uterino visualizado claramente. El os cervical debe ser ubicado.
2. El instrumento para tomar la muestra debe ser seleccionado de acuerdo con la forma y tamaño del cuello uterino y la ubicación de la unión escamocolumnar. La espátula de Ayre es adecuada para el muestreo de cervix en mujeres multiparas; la espátula y el cepillo pueden ser necesarios en mujeres en la postmenopausia cuando la unión escamocolumnar se encuentra dentro del canal endocervical.
3. El extremo puntiagudo de la espátula puede insertarse en el os cervical de cuellos uterinos nulíparos y el extremo redondo de la espátula insertarse en el os mas amplio del cuello uterino de la mujer multípara. El instrumento seleccionado debe rotarse 360 grados para remover células de la zona de transformación, unión escamocolumnar y canal endocervical.
4. El material obtenido en la espátula o el cepillo debe ser transferido inmediatamente a una lámina de vidrio que ha sido previamente marcada con el nombre de la paciente y su fecha de nacimiento.
5. La lámina de vidrio debe ser fijada inmediatamente con el fijador adecuado (alcohol al 95%) y transportado al laboratorio de citología en un contenedor para ser procesada junto con la correspondiente solicitud de citología.
6. Las muestras tomadas para Citología en Base Líquida deben ser estrictamente procesadas siguiendo las instrucciones de manufactura. Después de tomar la muestra, la punta del instrumento de muestreo debe separarse y depositarse en el medio de transporte en el contenedor provisto que debe ser entonces trasladado al laboratorio para su procesamiento.
7. Una descripción detallada del muestreo del cuello uterino se encuentra en el módulo de entrenamiento 3 (PROGRAMA DE CITOENTRENAMIENTO: Los procedimientos de la prueba Pap)

 

Toma de la muestra cervical usando un cepillo endocervical	Toma de la muestra del cervix. Note el extremo agudo de la espátula en el os cervical	Espátulas de Ayre y Aylesbury

 

Preparación de un frotis cervical. Note un contenedor de coplin con el fijador inmediatamente a la mano para prevenir el secado por aire	Una variedad de instrumentos para tomar la muestra: Cepillos endocervicales, espátulas de madera y escobilla

El fijado de los frotis de Pap

Un fijado adecuado es un paso esencial en la preparación de frotis de cuello uterino. Este asegura que las células se tiñan apropiadamente y se muestren claramente para su análisis microscópico y que se preserven para revisiones inmediatas y a futuro. El fijado puede lograrse sumergiendo completamente la lámina en uno de los fijadores de alcohol enumerados a continuación por 15 a 20 minutos después de los cual la lamina puede ser extraída del fijador y transportada al laboratorio para su tinción. Un método de fijado alternativo es el es spray fijador. El fijador spray contiene una base de alcohol y cera-carbón que proporcionan una delgada capa de cera protectora sobre la lámina. La cera-carbón debe ser retirada mediante la inmersión en alcohol antes de la tinción.

Un fijador satisfactorio tiene que cumplir ciertos requisitos

1. Debe penetrar las células rápidamente para que la detallada morfología celular sea mantenida.
2. El encogimiento celular debe ser mínimo y uniforme de forma que no ocurran distorsiones morfológicas.
3. Debe permitir la permeabilidad de las tinciones a través de las barreras celulares y ser apropiado para los métodos de tinción usados.
4. Debe permitir la adhesión celular a la lámina de vidrio para el análisis de microscopio.
5. Debe ser bactericida, no tóxico y permanente.

Los siguientes son fijadores adecuados para los frotis del cuello uterino que han de ser teñidos con el método de Papanicolaou

• Etanol al 95% (para un fijado óptima)
• Isopropanol al 80%
• Alcohol desnaturalizado al 95% (90 partes de etanol al 95%, cinco partes de metanol puro y cinco partes de isopropanol puro)
• Alcohol de grado reagente (metanol puro, isopropanol al 80% y acetona al 90%)

El fijado debe ser inmediato. El frotis no debe dejarse secar antes de ser fijado